Aline R. Gama; Marcos Antonio B. Carvalho Jr.; Isabela J. Wastowski; Stela O. Rodrigues; Maria Fernanda B. Souza; Lais S. Botacin; Melissa A. G. Avelino; Lilian Carla Carneiro
J. Bras. Patol. Med. Lab. 2021;57(1):1-5
ABSTRACT
INTRODUCTION: The human papillomavirus (HPV) detection favors treatments for patients with clinical manifestations and limits future consequences for those with asymptomatic infections.
OBJECTIVES: Therefore, the present study aimed to evaluate the sensitivity of polymerase chain reaction (PCR) for HPV detection from oral mucosa samples, of asymptomatic patients and patients with clinical manifestations of laryngeal papillomatosis.
MATERIAL AND METHODS: A total of 49 pediatric patient samples were obtained by exfoliation of the oral mucosa with a sterile brush. The deoxyribonucleic acid (DNA) samples was extracted and used for HPV detection, using GP5 and GP6 oligonucleotides, by conventional PCR and qPCR reactions.
RESULTS: Among the 49 samples, eight were from patients clinically diagnosed with laryngeal papillomatosis, but in both conventional PCR and qPCR technic, only one sample had presented positivity.
DISCUSSION: These results suggest that the sample type, the methodology used to collect, the extraction methodology used, the anatomical location of the lesion and the oligonucleotides used; all factors strongly influence the sensitivity of HPV detection by PCR methodology.
CONCLUSION: Thus, more studies are needed to better determine the sample collection, and the processing techniques present more reproducibility on PCR detection.
Keywords: papilloma; polymerase chain reaction; DNA primers; biopsy.
RESUMEN
INTRODUCCIÓN: El virus del papiloma humano (VPH) ayuda los tratamientos de pacientes que presentan manifestaciones clínicas y limita las consecuencias futuras para aquellos con infecciones asintomáticas.
OBJETIVOS: Evaluar la sensibilidad de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para detectar VPH en diferentes muestras.
MATERIAL Y MÉTODOS: Cuarenta y nueve muestras de pacientes pediátricos se obtuvieron por exfoliación de la mucosa oral con un cepillo estéril. Se utilizó el ácido desoxirribonucleico (ADN) de esas muestras para detectar VPH por PCR convencional y PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR).
RESULTADOS: Entre las 49 muestras, ocho eran de pacientes clínicamente diagnosticados con papilomatosis laríngea; sin embargo, tanto en la PCR convencional como en la qPCR, sólo una muestra presentó amplificación del fragmento esperado.
DISCUSIÓN: Eses resultados sugieren que el tipo de muestra, el método empleado en la recolección, el método de extracción, la ubicación anatómica de la lesión y los oligonucleótidos utilizados influyen fuertemente la sensibilidad de detección de VPH por PCR.
CONCLUSIÓN: Se necesita mayor investigación para determinar las mejores técnicas de recolección y procesamiento de muestras para que la detección de VPH por PCR sea más eficiente.
Palabras-clave: papiloma; reacción en cadena de la polimerasa; cartilla de ADN; biopsia.
RESUMO
p>INTRODUÇÃO: A detecção do papilomavírus humano (HPV) auxilia os tratamentos para pacientes que apresentam manifestações clínicas e limita as consequências futuras para os que apresentam infecções assintomáticas.
OBJETIVOS: Avaliar a sensibilidade da reação em cadeia da polimerase (PCR) para detecção de HPV em diferentes amostras.
MATERIAL E MÉTODOS: Quarenta e nove amostras de pacientes pediátricos foram obtidas por esfoliação da mucosa oral com uma escova estéril. O ácido desoxirribonucleico (DNA) dessas amostras foi utilizado para detecção de HPV por PCR convencional e PCR em tempo real (qPCR).
RESULTADOS: Das 49 amostras, oito eram de pacientes clinicamente diagnosticados com papilomatose laríngea; porém, tanto na PCR convencional quanto na qPCR, apenas uma amostra apresentou amplificação do fragmento esperado.
DISCUSSÃO: Esses resultados sugerem que o tipo de amostra, a metodologia empregada na coleta, a metodologia de extração empregada, a localização anatômica da lesão e os oligonucleotídeos utilizados influenciam fortemente a sensibilidade da detecção de HPV por PCR.
CONCLUSÃO: Mais estudos são necessários para determinar as melhores técnicas de coleta e processamento das amostras a fim de que a detecção de HPV por PCR seja mais eficiente.
Palavras-chave: papiloma; reação em cadeia da polimerase; primers do DNA; biópsia.
