Comparative evaluation of the quality of papanicolaou staining at different intervals of fixation times using 96% ethyl alcohol

Shirley Borges S. Quintana; Fabiano L. Carvalho; Glória Regina F. Silva; Maria Beatriz T. Campos; Maria Conceição S. Maia; Mario Lucio C. Araújo Júnior; Marcel S. B. Quintana
J. Bras. Patol. Med. Lab. 2019;55(1):38-48
DOI: 10.5935/1676-2444.20190006

ABSTRACT

INTRODUCTION: Fixation of cytological smears consists of immediate immersion in appropriate fixative, in order to preserve cellular morphological characteristics, it is essential for the microscopic examination and diagnostic interpretation.
OBJECTIVE: To evaluate the influence of fixation times on the morphological and staining characteristics of samples fixed in ethanol and stained by the Papanicolaou method.
METHOD: Experimental, quantitative and qualitative research was carried out on 99 samples of the jugal mucosa scrapings from 33 participants, fixed in 96% ethyl alcohol in three different times. Group A: 15 minutes; group B: 30 minutes; group C: seven days. The quality of staining was categorized in Optimal, Good, Regular and Poor, with subsequent recategorization at optimal and non-optimal. To verify the association among the groups and the categories, Fisher’s exact test was performed, with significance level of 0.05.
RESULTS: From the 99 stained slides, 19 were discarded due to acellularity, remaining 80 slides. From these, 28 in group A, 26 in group B and 26 in group C were evaluated. In Group A, optimal quality was found in 60.7% (n = 17), good in 28.6% (n = 8), regular in 10.7% (n = 3) and poor in 0% (n = 0). In group B optimal was found in 61.5% (n = 16), good in 30.8% (n = 8), regular in 7.7% (n = 2) and poor in 0% (= 0). In group C, optimal was found in 92.3% (n = 24), good in 7.7% (n = 2), regular in 0% (n = 0) and poor in 0% (n = 0). In the three groups, there was no representation of the Poor category.
CONCLUSION: The results suggest that there is a significant difference in the staining quality (p-value = 0.01) according to the fixation time.

Keywords: quality control; fixatives; cell biology.

RESUMEN

INTRODUCCIÓN: La fijación de extensiones citológicas consiste en la inmersión inmediata en fijador adecuado para preservar la morfología celular, siendo esencial para el análisis microscópico y la interpretación diagnóstica.
OBJETIVO: Evaluar la influencia de los tiempos de fijación en las características morfológicas y de tinción de muestras fijadas con metanol y teñidas con el método de Papanicolaou.
MÉTODO: Se realizó una investigación experimental, cuantitativa y cualitativa de 99 muestras de raspado de la mucosa yugal de 33 participantes, fijadas con etanol al 96% en tres tiempos distintos. Grupo A: 15 minutos; grupo B: 30 minutos; grupo C: 7 días. La calidad de la tinción fue categorizada en óptima, buena, regular y mala, con posterior reclasificación en óptima y no óptima. Para determinar la asociación entre los grupos y las categorías, se realizó la prueba exacta de Fisher, con un nivel de significación del 0,05.
RESULTADO: De las 99 muestras teñidas, 19 fueron desechadas por acelularidad, quedando 80 para ser analizadas. De estas muestras, 28 fueron evaluadas en el grupo A, 26 en el grupo B y 26 en el grupo C. En el grupo A, hemos encontrado calidad óptima – 60,7% (n =17); buena – 28,6% (n = 8); regular – 10,7% (n = 3) y mala – 0% (n = 0). En el grupo B, óptima – 61,5% (n = 16); buena – 30,8% (n = 8); regular – 7,7% (n = 2); y mala – 0% (n = 0). En el grupo C, óptima – 92,3% (n = 24); buena – 7,7% (n = 2); regular – 0% (n = 0) y mala – 0% (n = 0). En los tres grupos no hubo representación en la categoría mala.
CONCLUSIÓN: Los resultados sugieren que hay diferencia significativa en la calidad de la tinción (p = 0,01) de acuerdo con el tiempo de fijación.

Palabras-clave: control de calidad; fijadores; biología celular

RESUMO

INTRODUÇÃO: A fixação dos esfregaços citológicos consiste na imersão imediata em fixador adequado para preservar as características morfológicas celulares, sendo essencial para a análise microscópica e a interpretação diagnóstica.
OBJETIVO: Avaliar a influência dos tempos de fixação nas características morfológicas e tintoriais de amostras fixadas em álcool etílico e coradas pelo método de Papanicolaou.
MÉTODO: Realizou-se pesquisa experimental, quantitativa e qualitativa de 99 amostras de raspado da mucosa jugal de 33 participantes, fixadas em álcool etílico 96% em três tempos diferentes. Grupo A: 15 minutos; grupo B: 30 minutos; grupo C: sete dias. A qualidade da coloração foi categorizada em ótima, boa, regular e ruim, com posterior recategorização em ótimo e não ótimo. Para verificar a associação entre os grupos e as categorias, realizou-se teste exato de Fisher, com nível de significância de 0,05.
RESULTADO: Das 99 lâminas coradas, 19 foram desprezadas por acelularidade, restando 80 lâminas para serem analisadas. Destas, foram avaliadas 28 no grupo A, 26 no grupo B e 26 no grupo C. No grupo A, foi encontrada qualidade ótima – 60,7% (n = 17); boa – 28,6% (n = 8); regular – 10,7% (n = 3) e ruim – 0% (n = 0). No grupo B, ótima – 61,5% (n = 16); boa – 30,8% (n = 8); regular – 7,7% (n = 2); e ruim – 0% (n = 0). E no Grupo C, ótima – 92,3% (n = 24); boa – 7,7% (n = 2); regular – 0% (n = 0); e ruim – 0% (n = 0). Nos três grupos não houve representação na categoria ruim.
CONCLUSÃO: Os resultados sugerem que há diferença significativa na qualidade da coloração (p = 0,01) de acordo com o tempo de fixação.

Palavras-chave: controle de qualidade; fixadores; biologia celular.